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MKN-45 人胃癌細(xì)胞的詳細(xì)資料:
MKN-45 人胃癌細(xì)胞
細(xì)胞具體情況介紹:
細(xì)胞名稱 MKN-45 人胃癌細(xì)胞
來源 DSMZ 細(xì)胞庫
種屬 人
組織 胃
生長(zhǎng)特性 貼壁
建議使用培養(yǎng)基
1640+10%FBS |
成瘤情況 未成瘤
龍躍細(xì)胞庫簡(jiǎn)介:
我公司自有高品質(zhì)進(jìn)口來源細(xì)胞庫, 所有細(xì)胞來源為進(jìn)口母細(xì)胞, 經(jīng)過永生化處理制成傳代細(xì)胞株, 保證為國(guó)內(nèi)高品質(zhì)傳代細(xì)胞株。
另外我們有專門的工程師負(fù)責(zé)售后維護(hù)工作, 保證您購買細(xì)胞沒有后顧之憂, 如果對(duì)細(xì)胞品質(zhì)不滿意可以無條件退款或免費(fèi)重新發(fā)貨,直到滿意為止。
細(xì)胞處理方法
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
- 客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
- 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
- 顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
- 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
- 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
- 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
- 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)
維修 PCR/酶標(biāo)儀/所有實(shí)驗(yàn)室儀器
我公司維修站目前國(guó)內(nèi)有上海和北京兩個(gè)站點(diǎn) ( 北京和上海可以派專人上門檢測(cè)儀器并運(yùn)往維修站, 也可以發(fā)快遞我公司 ), 免費(fèi)檢查, 找到問題后報(bào)價(jià)維修, 如果報(bào)價(jià)后您覺得價(jià)格高的話可以不修(我們負(fù)責(zé)把機(jī)器原樣寄回)
實(shí)驗(yàn)室儀器維修, 包括PCR, 酶標(biāo)儀, 離心機(jī),分析儀器,天平,水分計(jì)等
從事維修工作的工程師有長(zhǎng)達(dá)20年的工作經(jīng)驗(yàn), 可勝任幾乎所有常規(guī)實(shí)驗(yàn)室儀器的維修及校準(zhǔn)等工作, 大熒光定量PCR, DNA測(cè)序儀,小到水分計(jì)都可以維修
細(xì)胞培養(yǎng)小課堂
細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程,細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞,又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等。
營(yíng)養(yǎng)條件
1.培養(yǎng)基
細(xì)胞培養(yǎng)基包含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),包括碳水化合物、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等。針對(duì)不同細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求,有多種合成培養(yǎng)基可供選擇,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。
2.其他添加成分
在各種合成培養(yǎng)基提供基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之外,還需根據(jù)不同細(xì)胞和不同的培養(yǎng)目的添加其他成分,如血清、因子等。
血清提供的是細(xì)胞外基質(zhì)、生長(zhǎng)因子和轉(zhuǎn)鐵蛋白等重要物質(zhì),常用的是胎牛血清。要根據(jù)不同的細(xì)胞和不同的研究目的決定添加血清的比例。10%~20%的血清能維持細(xì)胞較快的生長(zhǎng)增殖速度,稱為生長(zhǎng)培養(yǎng)液;為維持細(xì)胞緩慢生長(zhǎng)或不死,添加2%~5%的血清即可,稱為維持培養(yǎng)液。但血清中也存在有害于細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的物質(zhì),如補(bǔ)體、免疫球蛋白和一些生長(zhǎng)抑制因子;成分不明確,影響對(duì)結(jié)果的分析;不同動(dòng)物、不同批次的血清活性差別較大,影響培養(yǎng)效果的穩(wěn)定性。
谷氨酰胺是細(xì)胞生長(zhǎng)重要的氮源,在細(xì)胞生長(zhǎng)代謝過程中起重要作用,但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定容易降解,4℃下放置7天即可分解約50%,故谷氨酰胺需在使用前添加。
為防止污染,培養(yǎng)基中還需添加一定量的抗生素,常用抗生素名稱、濃度及敏感性如下表。 [1]
抗生素名稱 | 濃度 | 細(xì)菌敏感 | 支原體感染 |
青霉素 | 100U/ml | +++ | |
鏈霉素 | 100ug/ml | +++ | |
慶大霉素 | 50ug/ml | +++ | |
卡那霉素 | 100ug/ml | ++ | + |
紅霉素 | 50ug/ml | ++ | |
四環(huán)素 | 10ug/ml | ++ | ++ |
多粘菌素 | 50ug/ml | ++ | |
兩性霉素B | 3ug/ml | ++ | |
制霉菌素 | 50U/ml | ++ | |
截耳素衍生物 | 10ug/ml | +++ |
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